我院研究生在《Analytica Chimica Acta》发表最新研究成果
近期,我院2020级临床检验诊断学硕士研究生曾源远 (论文第一作者,导师:何洋教授)在病毒分子诊断研究领域取得新进展,建立了一种高灵敏的氧化石墨烯(GO)-Multiplex qPCR 检测系统,提高了SARS-CoV-2核酸检测的灵敏度,以用于低病毒载量样本的检测。相关研究成果以High sensitivity SARS-CoV-2 detection using graphene oxide-multiplex qPCR为题发表于《Analytica Chimica Acta》杂志(影响因子6.911)。
SARS-CoV-2检测的金标准是逆转录定量聚合酶链反应,也是目前临床应用最为广泛的检测方法。然而,由于各种原因导致样本中病毒载量过低时,该方法在临床实践中显示出大量假阴性结果,应予以高度警惕。因此,本研究利用GO对Multiplex qPCR进行改进,开发了高灵敏度的SARS-CoV-2核酸检测系统。
在该检测系统中,GO-正向引物复合体可以吸引了自由的单链模板和反向引物到复合体的GO片层表面。在退火时,模板与引物配对,形成双链结构。而GO对双链DNA的亲和力很低,所以GO表面的正向引物会被释放出来,并将其限制在GO片层之间,诱使目标基因在GO片层之间延伸。这种反应模式增加了引物-模板碰撞的机会,使之更容易形成扩增子,从而提高了目标基因的扩增效率。相较于常规的Multiplex qPCR,GO-Multiplex qPCR的检测限降低了10倍,为10拷贝/反应。因此,GO-Multiplex qPCR 检测系统为SARS-CoV-2的检测提供了一种新型的技术方案。
图GO-正向引物复合体在GO-Multiplex qPCR中的工作原理图示
Figure Graphical representation of the working principle of GO-forward primer composites in GO-Multiplex qPCR.